Երկար պեպտիդների սինթեզի խնդիրներ և լուծումներ

Կենսաբանական հետազոտություններում սովորաբար օգտագործվում են երկար հաջորդականությամբ պոլիպեպտիդներ։Հերթականության մեջ ավելի քան 60 ամինաթթու ունեցող պեպտիդների համար դրանք ստանալու համար սովորաբար օգտագործվում են գենային էքսպրեսիան և SDS-PAGE:Այնուամենայնիվ, այս մեթոդը երկար ժամանակ է պահանջում, և վերջնական արտադրանքի բաժանման ազդեցությունը լավ չէ:

Մարտահրավերներ և լուծումներ երկարատև պեպտիդների սինթեզի համար

Երկար պեպտիդների սինթեզում մենք միշտ բախվում ենք խնդրի հետ, այսինքն՝ սինթեզի հաջորդականության մեծացմամբ մեծանում է խտացման ռեակցիայի ստերիկ խոչընդոտը, և ռեակցիան ամբողջական դարձնելու համար անհրաժեշտ է կարգավորել ռեակցիայի ժամանակը։Այնուամենայնիվ, որքան երկար է արձագանքման ժամանակը, այնքան ավելի շատ կողմնակի ազդեցություններ են առաջանում, և ձևավորվում է թիրախային պեպտիդի մի մասը:Նման մնացորդները՝ պակաս պեպտիդային շղթաները հիմնական կեղտերն են, որոնք առաջանում են երկար պեպտիդների սինթեզում:Հետևաբար, երկար պեպտիդների սինթեզում հիմնական խնդիրը, որը մենք պետք է հաղթահարենք, բարձրորակ ռեակցիայի պայմաններն ու ռեակցիայի մեթոդներն ուսումնասիրելն է, որպեսզի ամինաթթուների խտացման ռեակցիան ավելի ընդգրկուն և լիարժեք դարձնենք:Բացի այդ, կրճատեք ռեակցիայի ժամանակը, քանի որ որքան երկար է արձագանքման ժամանակը, այնքան ավելի անվերահսկելի կողմնակի ռեակցիաները, այնքան ավելի բարդ են կողմնակի արտադրանքները:Այսպիսով, ամփոփվում են հետևյալ երեք կետերը.

Միկրոալիքային սինթեզը կարող է օգտագործվել. Սինթեզի գործընթացում հանդիպող որոշ ամինաթթուների համար, որոնք հեշտ չէ ինտեգրվել, կարող է օգտագործվել միկրոալիքային սինթեզ:Այս մեթոդը ունի ուշագրավ արդյունքներ և մեծապես նվազեցնում է ռեակցիայի ժամանակը և նվազեցնում է երկու հիմնական կողմնակի արտադրանքի ձևավորումը:

Կարող է օգտագործվել բեկորների սինթեզի մեթոդըԵրբ որոշ պեպտիդներ դժվար է սինթեզվել սովորական սինթեզի մեթոդներով և հեշտ չէ մաքրվել, մենք կարող ենք ընդունել մի քանի ամինաթթուների ամբողջ խտացումը պեպտիդի որոշակի հատվածում դեպի պեպտիդային շղթան որպես ամբողջություն:Այս մեթոդը կարող է լուծել նաև սինթեզի բազմաթիվ խնդիրներ։

Ակիլհիդրազիդի սինթեզը կարող է օգտագործվելՊեպտիդների ացիլհիդրազիդային սինթեզը N-տերմինալ Cys պեպտիդի և C-տերմինալ պոլիպեպտիդ հիդրազիդի պինդ փուլային սինթեզի մեթոդ է ամիդային կապերի ձևավորման միջև պեպտիդային կապի մեթոդի հասնելու համար:Ելնելով պեպտիդային շղթայում Cys-ի դիրքից՝ այս մեթոդը ամբողջ պեպտիդային շղթան բաժանում է մի քանի հաջորդականությունների և համապատասխանաբար սինթեզում դրանք։Ի վերջո, թիրախային պեպտիդը ստացվում է հեղուկ փուլային խտացման ռեակցիայի միջոցով:Այս մեթոդը ոչ միայն մեծապես նվազեցնում է երկար պեպտիդի սինթեզի ժամանակը, այլև զգալիորեն մեծացնում է վերջնական արտադրանքի մաքրությունը:

Երկարատև պեպտիդային մաքրում

Երկար պեպտիդների առանձնահատկությունն անխուսափելիորեն հանգեցնում է չմշակված պեպտիդների բարդ բաղադրիչներին:Հետևաբար, դժվար է նաև երկարատև պեպտիդները HPLC-ով մաքրելը:Պոլիպեպտիդների մաքրման գործընթացի ամիլոիդ շարքը, ներծծելով մեծ փորձ և հաջողությամբ օգտագործվում է երկարատև պեպտիդների մաքրման մեջ:Ընդունելով նոր սարքավորումներ, բազմակի մաքրման համակարգերի խառնում, կրկնվող տարանջատում և փորձառության այլ մեթոդներ՝ երկարատև պեպտիդային մաքրման հաջողության մակարդակը զգալիորեն բարելավվել է: