Առավել հակված են HPLC-ի խափանումներին և լուծումներին

Որպես բարձր ճշգրտության գործիք՝ HPLC-ն հեշտությամբ կարող է հանգեցնել որոշ անհանգիստ փոքր խնդիրների, եթե այն ճիշտ չշահագործվի օգտագործման ընթացքում:Ամենատարածված խնդիրներից մեկը սյունակի սեղմման խնդիրն է:Ինչպես արագ վերացնել անսարք քրոմատոգրաֆը:HPLC համակարգը հիմնականում բաղկացած է ջրամբարի շշից, պոմպից, ներարկիչից, սյունակից, սյունակի ջերմաստիճանի պալատից, դետեկտորից և տվյալների մշակման համակարգից:Ամբողջ համակարգի համար հենասյուները, պոմպերը և դետեկտորները հիմնական բաղադրիչներն են և հիմնական վայրերը, որոնք հակված են խնդիրներին:

Սյունակի ճնշման բանալին այն տարածքն է, որը մեծ ուշադրություն է պահանջում HPLC-ի օգտագործման ժամանակ:Սյունակի ճնշման կայունությունը սերտորեն կապված է քրոմատոգրաֆիկ գագաթնակետի ձևի, սյունակի արդյունավետության, տարանջատման արդյունավետության և պահպանման ժամանակի հետ:Սյունակի ճնշման կայունությունը չի նշանակում, որ ճնշման արժեքը կայուն է կայուն արժեքի դեպքում, այլ ավելի շուտ, որ ճնշման տատանման միջակայքը 345 կՊա կամ 50 PSI է (թույլ է տալիս օգտագործել գրադիենտ էլյուցիան, երբ սյունակի ճնշումը կայուն է և դանդաղ փոխվում է):Շատ բարձր կամ շատ ցածր ճնշումը սյունակի ճնշման խնդիր է:

Առավել հակված են HPLC-ի խափանումներին և լուծումներին

1, բարձր ճնշումը HPLC-ի օգտագործման ամենատարածված խնդիրն է:Սա նշանակում է ճնշման հանկարծակի բարձրացում:Ընդհանուր առմամբ, կան հետևյալ պատճառները. (1) Ընդհանուր առմամբ, դա պայմանավորված է հոսքի ալիքի խցանմամբ:Այս պահին մենք պետք է այն ուսումնասիրենք մաս-մաս:ա.Նախ, կտրեք վակուումային պոմպի մուտքը:Այս պահին PEEK խողովակը լցվեց հեղուկով, այնպես որ PEEK խողովակը ավելի փոքր էր, քան լուծիչի շիշը, որպեսզի տեսներ, թե արդյոք հեղուկը կաթում է ըստ ցանկության:Եթե ​​հեղուկը չի կաթում կամ դանդաղ կաթում է, լուծիչի ֆիլտրի գլուխը արգելափակված է:Բուժում. Կես ժամ թրմեք 30% ազոտաթթվի մեջ և լվացեք գերմաքուր ջրով։Եթե ​​հեղուկը պատահականորեն կաթում է, ապա լուծիչի ֆիլտրի գլուխը նորմալ է և ստուգվում է.բ.Բացեք Purge փականը, որպեսզի շարժական փուլը չանցնի սյունակի միջով, և եթե ճնշումը զգալիորեն չի նվազում, ֆիլտրի սպիտակ գլուխը արգելափակված է:Բուժում. Զտված սպիտակ բշտիկները հեռացվել են և կես ժամ 10% իզոպրոպանոլով քսել:Ենթադրելով, որ ճնշումը իջնում ​​է 100PSI-ից ցածր, զտված սպիտակ գլուխը նորմալ է և ստուգվում է;գ.Հեռացրեք սյունակի ելքի ծայրը, եթե ճնշումը չի նվազում, սյունը արգելափակված է:Բուժում. Եթե դա բուֆերային աղի խցանում է, ողողեք 95%-ով, մինչև ճնշումը նորմալանա:Եթե ​​խոչընդոտը պայմանավորված է ավելի շատ պահպանված նյութի պատճառով, ապա պետք է օգտագործվի ավելի ուժեղ հոսք, քան ներկայիս շարժական փուլը, որպեսզի շտապի դեպի նորմալ ճնշում:Եթե ​​երկարաժամկետ մաքրման ճնշումը չի նվազում վերը նշված մեթոդի համաձայն, ապա սյունակի մուտքն ու ելքը կարելի է համարել, որ միացված են գործիքին, ընդհակառակը, իսկ սյունը կարելի է մաքրել շարժական փուլով։Այս պահին, եթե սյունակի ճնշումը դեռ չի կրճատվել, սյունակի մուտքի մաղի ափսեը կարող է փոխարինվել միայն, բայց երբ աշխատանքը լավ չէ, հեշտ է հանգեցնել սյունակի էֆեկտի նվազմանը, ուստի փորձեք ավելի քիչ օգտագործել:Բարդ խնդիրների դեպքում կարելի է դիտարկել սյունակի փոխարինումը:

(2) Հոսքի արագության սխալ կարգավորում. ճիշտ հոսքի արագությունը կարող է վերականգնվել:

(3) Սխալ հոսքի հարաբերակցություն. հոսքերի տարբեր համամասնությունների մածուցիկության ինդեքսը տարբեր է, և ավելի մեծ մածուցիկությամբ հոսքի համապատասխան համակարգային ճնշումը նույնպես ավելի մեծ է:Հնարավորության դեպքում, ավելի ցածր մածուցիկությամբ լուծիչները կարող են փոխարինվել կամ վերակայվել և պատրաստվել:

(4) Համակարգի ճնշման զրոյական շեղում. կարգավորեք հեղուկի մակարդակի ցուցիչի զրոն:

2, ճնշումը չափազանց ցածր է (1) սովորաբար պայմանավորված է համակարգի արտահոսքով:Ինչ անել. Գտեք յուրաքանչյուր կապ, հատկապես ինտերֆեյսը սյունակի երկու ծայրերում և խստացրեք արտահոսքի տարածքը:Հեռացրեք սյունը և ամրացրեք կամ գծեք PTFE թաղանթը համապատասխան ուժով:

(2) Գազը մտնում է պոմպ, բայց ճնշումը սովորաբար այս պահին անկայուն է՝ բարձր և ցածր:Ավելի լուրջ, պոմպը չի կարողանա կլանել հեղուկը:Բուժման եղանակը՝ բացեք մաքրող փականը և մաքրեք 3~5 մլ/րոպե հոսքի արագությամբ:Եթե ​​ոչ, ապա օդային փուչիկները արտանետվող փականի մոտ ներծծվում էին հատուկ ասեղի խողովակի միջոցով:

(3) Շարժական փուլի արտահոսք չկա. ստուգեք, թե արդյոք կա շարժական փուլ ջրամբարի շշի մեջ, արդյոք լվացարանը ընկղմված է շարժական փուլի մեջ և արդյոք պոմպը աշխատում է:

(4) Հղման փականը փակված չէ. հղման փականը փակվում է դանդաղումից հետո:Այն սովորաբար իջնում ​​է մինչև 0.1:~ 0,2 մլ/րոպե հղման փականը փակելուց հետո:

Ամփոփում:

Այս հոդվածում վերլուծվում են միայն հեղուկ քրոմատոգրաֆիայի ընդհանուր խնդիրները:Իհարկե, մեր գործնական կիրառման մեջ մենք կհանդիպենք ավելի շատ այլ խնդիրների։Խափանումները լուծելիս մենք պետք է հետևենք հետևյալ սկզբունքներին. միայն մեկ գործոն փոխենք՝ հիպոթետիկ գործոնի և խնդրի միջև կապը որոշելու համար.Ընդհանրապես, անսարքությունների վերացման համար մասերը փոխարինելիս պետք է ուշադրություն դարձնել ապամոնտաժված անձեռնմխելի մասերը տեղում դնելու վրա՝ թափոնները կանխելու համար.Լավ ձայնագրման սովորություն ձևավորելը սխալների հետ աշխատելու հաջողության բանալին է:Եզրափակելով, HPLC-ն օգտագործելիս կարևոր է ուշադրություն դարձնել նմուշների նախնական մշակմանը և սարքավորումների պատշաճ շահագործմանն ու պահպանմանը: