Ֆոսֆորաթթվի պեպտիդի հասկացությունը

Այն կարևոր դեր է խաղում կյանքի գործընթացներում՝ ֆոսֆորիլացնելով Tyrr, Ser, Thr, որոնք տեղակայված են պեպտիդների վրա։Ֆոսֆորիլացված ամինաթթուն սովորաբար օգտագործվում է ֆոսֆորաթթվի պեպտիդների արտադրության մեջ, որը ներկայումս օգտագործվում է մեկ ֆենիլֆոսֆորիլացված ամինաթթուներում:HBTU/ֆոսֆորիլացված ամինաթթուները սովորաբար օգտագործվում են ֆոսֆորիլացված ամինաթթուների HOBt/DIEA մեթոդը միացնելու համար, բայց ֆոսֆորաթթվի պեպտիդն ընտրում է այս մոտեցման թերությունները, հատկապես գեներացված շատ ավելի երկար պեպտիդային պեպտիդներում կամ ամինաթթու ֆոսֆատում, միացման արդյունավետությունը ցածր է, ցածր: վերջնական արտադրանքի մաքրությունը.Այս ֆոսֆոպեպտիդի համար մենք դիտարկել ենք ընտրովի հետֆոսֆորիլացման մոտեցում:Գեներացիայի գործընթացը ամինաթթուների կողմնակի շղթայի պաշտպանիչ խմբերի ընտրովի հեռացումն է, որոնք պետք է պիտակվեն պեպտիդների սինթեզից հետո:Tyr-ի համար Thr-ը կարող է ուղղակիորեն արձագանքել՝ օգտագործելով անպաշտպան կողային շղթաներով ամինաթթուներ:-Ser (trt), քանակապես հեռացվել է 1%TFA /DCM միջավայրում:

Ֆոսֆորիլացումը, կրկնակի բենզոլ ֆոսֆիտ ֆոսֆորամիդի և չորս ազոտի հետ առաջանում է, և ֆոսֆորամիդ տետրազոլիումի ակտիվ միջանկյալները միացված են հիդրօքսիին, այնուհետև թթվային պերօքսիդի օքսիդացման ներքո ֆոսֆորիլ ձևավորվում է ամբողջական ռեակցիա:

Ներկայումս պեպտիդային ֆոսֆորիլացված ձևափոխման մեթոդը երկու հիմնական տեսակ է.

(1) չափավոր երաշխավորված ֆոսֆորիլացված ամինաթթուների ուղղակի ներմուծում պոլիպեպտիդային հաջորդականության մեջ.

(2) պեպտիդային հաջորդականության վրա առաջացած խեժից հետո, դեպի կողային շղթայի հիդրոքսիլի Ser, Tyr կամ Thr ֆոսֆորիլացումը:

1) չափավոր կերաշխավորի ֆոսֆորիլացված ամինաթթուները ուղղակիորեն ներմուծել պեպտիդային հաջորդականություն.

Այսինքն՝ ամինաթթուները, որոնք պետք է ֆոսֆորիլացվեն, նախապես կֆոսֆորիլացվեն և համապատասխան կերպով պաշտպանվեն՝ օգտագործելով (Thr, Ser կամ Tyr), այնուհետև ֆոսֆորիլացումը կնեղացվի մինչև պոլիպեպտիդային ինդեքսի ընտրության կետը՝ հիմնվելով SPPS-ի արտադրության նորմալ գործընթացի վրա: .Այս մեթոդը հեշտ է գործել, դարձել է պեպտիդային ձեռնարկությունների ֆոսֆորիլացված ձևափոխման հիմնական մեթոդը:

2) պեպտիդային հաջորդականության վրա առաջացած խեժից հետո, դեպի Ser հիդրօքսի ֆոսֆորիլացում, Tyr կամ Thr կողային շղթաներ.

Ֆոսֆորիլացման ձևավորում՝ օգտագործելով մեկ կծկման ֆոսֆորիլացումը պոլիպեպտիդային մեթոդով, կողային շղթայի ձևավորման մեջ մեծ խմբերի կողմից առաջացած ստերիկ խանգարման պատճառով, դժվար է ամինաթթուների ֆոսֆորիլացումը պեպտիդային շղթայով նեղանալ:Ապագայում ամինաթթուների ներմուծումն ավելի դժվար կլինի, հատկապես ֆոսֆորիլացման բազմաթիվ տեղամասեր պարունակող հարդարման մեջ, առաջացումը կդառնա չափազանց դժվար, վերջնական արտադրանքի բաղադրությունը բարդ է, դժվար է առանձնացնել, իսկ եկամտաբերությունը՝ չափազանց ցածր:

Հետևաբար, երբ պեպտիդային շղթայի մի քանի տեղամասեր ֆոսֆորիլացված են, կարելի է ընտրել պեպտիդային հաջորդականությունը խեժի վրա ստեղծել, այնուհետև ֆոսֆորիլացնել այն Ser, Tyr կամ Thr-ի կողային շղթայի հիդրոքսիլ խմբի կողմից. դրա առաջացումը հիմնականում ներառում է ընտրովի հեռացում: կողային շղթայի պաշտպանիչ խումբ, որը պահանջում է ամինաթթուների ճանաչում պեպտիդների սինթեզից հետո:Tyr-ի համար Thr-ը կարող է ուղղակիորեն օգտագործել ամինաթթուների կողմնակի շղթաները, որոնք պաշտպանված չեն ի պատասխան:

Կողային շղթայի պաշտպանության հիմքը 1% TFA/DCM միջավայրը կարող է քանակապես հեռացվել:Երբ ընտրվում է այս մեթոդը, ֆոսֆորամիդիտ տետրազոլիումի ակտիվ միջանկյալ նյութը կարող է առաջանալ դիբենզիլ ֆոսֆորամիդիտի և տետրազոլիումի միջոցով, որոնք կապված են հիդրօքսիլ խմբի հետ, այնուհետև օքսիդացվել՝ պերօքսիաթթվային միջավայրում ֆոսֆորիլ խումբ ձևավորելու համար՝ ռեակցիան ավարտելու համար: